国家开放大学2024年春《植物病虫害防治基础-浙江》实验任务1参考答案

2024年4月1809:37:20发布者:国开文档专家 53 views 举报
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实验报告 1

实验名称

植物病害生防菌的分离、培养

实验目的

生防菌主要有细菌、放线菌和真菌三大类。植物病害生防

菌的分离培养是利用生防菌进行植物病害生物防治研究和应用

的前提。为了获得生防菌的纯培养,首先必须把目的生防菌分

离出来,再根据不同生防微生物生长所需营养和环境条件,使

其在平板培养基上形成菌落,从而获得纯培养物。

通过本实验学习生防菌的常规分离、培养和纯化技术,学

习从菌落及培养特征等方面区分细菌、放线菌和真菌的类别。

实验步骤

(一)土壤生防菌的分离和培养

1.土壤生防菌的分离

土壤稀释平板法是应用最广泛的一种分离和计数土壤中放

线菌、细菌和大量产孢真菌的方法。

① 取经过风干过筛后的土样 10 g,放入盛有 90 mL 无菌水

的三角瓶中,振荡约 20 min,使土与水充分混合,将菌分散,

制成 10-1 浓度土壤悬浮液。

② 在悬浮液沉降前吸 1 mL 加入另一盛有 9 mL 无菌水的三

角瓶中振荡摇匀,即为 10-2 浓度悬浮液。同样方法,逐级稀

释成不同的系列悬浮液。

③ 然后根据土样或所需分离的微生物,取一定稀释度的悬

浮液 0.1mL 加在已制好的平板培养基上,用玻璃刮铲将稀释液

在培养基上充分混匀铺平,倒置于 25~30℃恒温箱培养。

④ 根据不同微生物生长速度不同,分别于 2d,3d,5d 观

察记载分离结果。一般认为,每个平板上达到 50~150 个菌落

的适当分离稀释度为放线菌 10-3~10-4,细菌 10-5~10-6,真

菌 10-4~10-5。

分离一般真菌和细菌常用 PDA 培养基和牛肉膏蛋白胨琼脂

NA 培养基。有时为提高分离效果,可在 PDA 中加入 1000 mg/kg

链霉素等以抑制细菌生长,或在牛肉膏蛋白胨琼脂 NA 培养基

中加入五氯硝基苯等以抑制真菌生长。放线菌分离一般采用高

氏 1 号培养基。

2.土壤中生防菌的培养

分离于平板的生防细菌和放线菌,一般可置于 28℃(真菌

25℃左右)下培养,待长出菌落后,用接种环挑取菌落于平板

划线培养,再次形成菌落后,于斜面划线培养,置于 4℃冰箱

保存 。真菌用接种铲取菌落 边缘 同培养基 入斜面培养,

产孢后置于 4℃冰箱 保存

)植物 体表 生防菌的分离和培养

1.生防菌的分离

(1)水

① 取 叶片 5 10 ,在 来水下 冲去 浮土, 干,用 打孔

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